基本信息
菌株編號(hào) : ml-CC1165
菌株品牌 : 酶聯(lián)生物
細(xì)胞規(guī)格 : 100μl
細(xì)胞儲(chǔ)存 : -20℃
菌株抗性 : 無抗
培 養(yǎng) 基 : YPDA
菌株類別 : 酵母菌
培養(yǎng)條件 : 28℃,有氧,YPDA
基 因 型 : MATahisΔ200trp1-901leu2-3,112ade2LYS2::(lexAop)4-HIS3ura3::(lexAop)8-lacZ ade2::(lexAop) 8-ADE2 GAL4
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化 : 電轉(zhuǎn)
保存方式 : 30%甘油,-20℃
基本應(yīng)用 : 酵母雙雜交
菌株簡(jiǎn)介 : DUALmembrane系統(tǒng)是DUALsystems BioTech公司開發(fā)的專門篩選跨膜蛋白間相互作用的檢測(cè)技術(shù),它利用分離的泛素系統(tǒng)(split-ubiquitin)直接檢測(cè)天然狀態(tài)下膜蛋白間的相互作用,是目前市面上唯一檢測(cè)膜蛋白間相互作用的酵母雙雜系統(tǒng)。此系統(tǒng)采用NMY51酵母菌株,可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進(jìn)行蛋白互作驗(yàn)證或篩庫(kù)試驗(yàn);此菌株Transformation marker為: trp1, leu2-3,報(bào)告基因?yàn)椋篐IS3, ADE2 和 lacZ,第一步通過營(yíng)養(yǎng)缺陷型報(bào)告基因(HIS3, ADE2)進(jìn)行選擇性生長(zhǎng)篩選,進(jìn)一步通過 LacZ 報(bào)告基因進(jìn)行β-半乳糖分析顯色的定量或半定量篩選,三個(gè)獨(dú)立的報(bào)告基因,受不同啟動(dòng)子的調(diào)控,降低假陽性幾率。原理:泛素(ubiquitin)分子量很小,由 76aa 殘基組成;泛素作為降解信號(hào)分子,可以連接另外一種蛋白質(zhì)的 N 端,然后被泛素專一性蛋白酶(UBPs)識(shí)別,從而導(dǎo)致與泛素相連的蛋白被酶解。泛素可以人為分成兩部分:N 端(Nub),C 端(Cub)。首先,人為地將泛素 Nub 的 3 位異亮氨酸突變?yōu)楦拾彼幔∟ubI 突變?yōu)?NubG)。這樣與 Cub 的親合力大大降低,避免了 Cub 和 Nub 自我結(jié)合或接近的可能性。其次,將Cub 部分與人工合成的 LexA-VP16 轉(zhuǎn)錄激活因子融合成一個(gè)融合蛋白Cub-LexA-VP16。正常條件下 NubG不與Cub 結(jié)合,UBPs 也不能識(shí)別分離的泛素,轉(zhuǎn)錄激活因子也不會(huì)被切下來。最后,將要檢測(cè)的蛋白質(zhì)分別與NubG和Cub融合,形成 bait 融合蛋(bait-cub-LexA -VP16)和 prey 融合蛋白(prey-NubG)。如果 bait 和 prey發(fā)生相互作用,就會(huì)促使 NubG 和 Cub 的相互接近,被 UBPs 識(shí)別,導(dǎo)致 LexA-VP16 的解離,進(jìn)入核內(nèi),從而激活報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄。 此系統(tǒng)可使用四種Bait質(zhì)粒:pBT3-N,pBT3-SUC,pBT3-STE,pBT3-C,篩選標(biāo)志均為L(zhǎng)EU;三種Prey質(zhì)粒:pPR3-C ,pPR3-SUC,pPR3-STE,篩選標(biāo)志均為TRP。NMY51酵母菌株可用YPDA在28℃有氧的條件下培養(yǎng),然后使用30%的甘油保藏菌種。
供應(yīng)范圍 : 僅供限于科研實(shí)驗(yàn)研究使用
運(yùn)輸方式 : 低溫快遞運(yùn)輸
菌株優(yōu)勢(shì) : 酶聯(lián)生物菌株庫(kù)擁有200種菌株 , 遺傳性狀一致
特別說明 : 細(xì)胞購(gòu)買/細(xì)胞培養(yǎng)/動(dòng)物血清/實(shí)驗(yàn)服務(wù)/原代提取/菌株購(gòu)買,請(qǐng)立即與酶聯(lián)生物聯(lián)系
售后服務(wù)
細(xì)胞予重發(fā)
1. 細(xì)胞運(yùn)輸中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā)。
2.收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā)。
3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。
4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置2小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。
5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時(shí)并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。
6.細(xì)胞活性問題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。
細(xì)胞不重發(fā)
1.客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā)。
2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。
3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。
4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā)。
5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā)。
6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,不重發(fā)。